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限制性内切酶制備關鍵技術研究
2023-11-02 19:00  

  限制性内切酶(簡稱限制酶)是基因工程中的基礎工具,廣泛應用于二代測序、醫療診斷、食品檢測和農業遺傳育種等領域。限制酶由于自身特點,其制備具有較高的技術難度,多年來被美國New England Biolabs公司、美國賽默飛世爾公司和日本Takara Bio公司壟斷,是我國生物技術領域的一項“卡脖子”技術。本研究成果,發表科技論文2篇,申報國家發明專利5件(目前獲得授權1件),形成快速限制酶品種40餘種,在品種數量上超過了日本Takara Bio公司,列世界第三位;限制酶量産制備技術是國内唯一。

 

成果形式:新技術、新工藝

 

技術指标:

 

5-15分鐘内完成快速酶切;

 

通用緩沖液;

 

無星号活性;

 

高酶活冗餘度;

 

反應體系兼容下遊實驗。

 

創新點:限制性内切酶(簡稱限制酶)由于自身特點,其制備具有較高的技術難度,包括:(1)限制酶包含200多個品種,來源完全不同,相互之間無直接關聯,研發工作無法舉一反三;(2)限制酶可切斷DNA,對于表達宿主細胞是毒性蛋白,大量表達十分困難。本研究通過開發以下技術解決上述問題:(1)構建和篩選一系列高表達工程菌株;(2)研究提高限制酶比活力的分子機理;(3)建立操作簡便、判斷标準明晰的質量控制體系。

 

成熟程度:成熟

 

合作方式:技術開發、技術咨詢、技術服務

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